原代細(xì)胞分離的具體方法如下

　　原代細(xì)胞分離是指從動(dòng)物或人體組織中直接分離出細(xì)胞，并將組織分散制成細(xì)胞懸液后從中獲取目的細(xì)胞的過(guò)程。是直接取自活組織的細(xì)胞，用于體外生長(zhǎng)。這些細(xì)胞經(jīng)歷了非常少的群體倍增，因此與連續(xù)（腫瘤或人工永生化）細(xì)胞系相比，它們更能代表所衍生組織的主要功能成分，成為更具代表性的體內(nèi)模型。

　　原代細(xì)胞分離的方法

　　1、機(jī)械分離法：

　　主要適用于纖維組織和肌肉組織等堅(jiān)硬組織。

　　操作步驟：先將樣品用鉗子或剪刀細(xì)剁成小碎片，再用組織破碎機(jī)或勻漿器等器械破碎，使細(xì)胞得以自由分散。最后通過(guò)濾網(wǎng)將細(xì)胞分離。

　　2、酶消化法：

　　是將組織分解成單個(gè)細(xì)胞的常用方法。

　　通過(guò)選用合適酶的不同濃度、作用時(shí)間和溫度，可以使不同類型的細(xì)胞得到分離。

　　常用的消化酶有膠原酶、胰蛋白酶等。

　　3、貼壁法：

　　主要適用于基質(zhì)附著型細(xì)胞，例如成肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等。

　　操作步驟：將組織切成適當(dāng)大小的小塊，置于培養(yǎng)皿中，加入培養(yǎng)液。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后，未附著于基質(zhì)的細(xì)胞會(huì)被洗掉，貼著基質(zhì)的細(xì)胞則會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)。

　　4、懸浮培養(yǎng)法：

　　適用于以血液為基礎(chǔ)的細(xì)胞，例如淋巴細(xì)胞、白血細(xì)胞等。

　　操作步驟：將血液加入離心管中，慢慢離心分離淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等，最后將上清液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中。