細(xì)胞劃痕檢測實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)儀器

超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以，但感覺6孔比較好，大小適中)、marker筆、直尺20、微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、PBS

細(xì)胞劃痕檢測實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺(tái)內(nèi))

實(shí)驗(yàn)流程

1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm- -道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。

2.在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。

3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。

4.用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0, 6, 12, 24小時(shí)取樣，拍照。

細(xì)胞劃痕檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容與方法

1、使用marker筆在6孔板背后，均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm-道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。

2、在孔中加入約5*105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。

3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。

4、用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0, 6, 12, 24小時(shí)取樣，拍照。