實(shí)驗(yàn)的步驟你明白了嗎?
更新時(shí)間:2020-07-30 點(diǎn)擊次數(shù):883
實(shí)驗(yàn)于獨(dú)立于科研機(jī)構(gòu)之外的第三方實(shí)驗(yàn)室,第三方實(shí)驗(yàn)室不僅是實(shí)驗(yàn)設(shè)備先進(jìn),可操作實(shí)驗(yàn)的規(guī)模和種類也是多種多樣,國(guó)家層面也出臺(tái)政策推動(dòng)科研單位與企業(yè)利用資源優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),提高科研效率。
實(shí)驗(yàn)的步驟:
細(xì)胞培養(yǎng)方法:從生物體內(nèi)取出細(xì)胞或組織,在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,在無菌、適當(dāng)溫度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng),使之生存和生長(zhǎng)為此其結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)。
SDS-PAGE方法:解聚后的蛋白質(zhì)分子與SDS充分結(jié)合形成帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物,復(fù)合物所帶的負(fù)電荷大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,這就消除了不同蛋白質(zhì)分子之間原有的電荷差異,因此這種復(fù)合物在SDS-PAGE系統(tǒng)中的電泳遷移率不再受蛋白質(zhì)原有電荷的影響,而主要取決于蛋白質(zhì)及其亞基分子量的大小。
Western blot方法:經(jīng)過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。
免疫熒光方法:熒光抗體法是一種將抗原、抗體的結(jié)合反應(yīng)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的方法。該法把血清學(xué)的特異性、熒光色素的敏感性、顯微鏡檢查法集為一體,擴(kuò)大了免疫學(xué)診斷的效果,是近代免疫學(xué)的一種重要研究手段。 技術(shù)分類: 熒光抗體技術(shù) 、免疫熒光測(cè)定。