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小鼠脾臟單細胞懸液的制備方法

更新時(shí)間:2024-06-14      點(diǎn)擊次數:281

1. 8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。

2. 75%的酒精中,浸泡5min。

3. 無(wú)菌狀態(tài)下取脾臟。

4. 取一干凈10cm大皿,放入無(wú)菌的70um濾網(wǎng),將脾臟置于濾網(wǎng)上,加入2ml培養基。

5. 用研磨棒輕輕研磨臟器,將脾臟組織研磨成單細胞狀態(tài),直到只剩下臟器的結締組織為止。

6. 研磨時(shí)動(dòng)作應輕柔,用力過(guò)大可導致細胞死亡。

7. 棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結締組織,收集平皿內的細胞懸液,400g4min離心沉淀。

8. PBS重懸沉淀,就可以進(jìn)行后續實(shí)驗。


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