淺看免疫組化技術(shù)服務(wù)的切片制備

　　免疫組化技術(shù)服務(wù)是伊萊博生物實(shí)驗(yàn)組成之一，作為常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)，日常實(shí)驗(yàn)之一。該實(shí)驗(yàn)由從事動(dòng)物實(shí)驗(yàn)專業(yè)，經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行操作。免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理—抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究方法。

　　免疫組化技術(shù)服務(wù)的切片制備：

　　1、洗載玻片：將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了將載玻片上的硅膠等除去，同時(shí)使一些肉眼看不見(jiàn)的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4(大約沖一個(gè)小時(shí)左右)，再將載玻片浸泡于酒精之中，然后放到架子上，置于37°C溫箱中，將多聚賴氨酸涂布于玻片的表面，由于Lys帶正電，而大多數(shù)的組織帶負(fù)電荷，從而產(chǎn)生吸附作用。

　　2、包埋組織：先在鐵模具中加入一些液態(tài)石蠟，先稍微冷卻，然后再將待包埋的組織置于石蠟之中，并排列整齊，再將塑料模具盒蓋上，后加入少許液體石蠟，進(jìn)行冷凍，使石蠟變成固態(tài)。

　　3、切片：將包埋好的組織從模具上取下來(lái)，并置于石蠟切片機(jī)上，切片機(jī)通過(guò)調(diào)節(jié)上下左右來(lái)使組織和切割方向一致，然后調(diào)節(jié)切片的厚度，一般為5mm，如果比較難切，則可以適當(dāng)調(diào)整厚度。用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40°C溫水中。

　　4、撈組織：當(dāng)組織載玻片置于40°C溫水中之前，要先將水浴中的氣泡趕走，以免氣泡受熱上浮而貼到組織上，組織受熱展開(kāi)，好是組織不起皺紋，用載玻片撈組織時(shí)，一般取載玻片的下1/3或者下1/2一般每種組織撈5-6張，其中2-3張是備用的，每張載玻片上通常撈兩份組織，做對(duì)照使用，這樣形成的誤差就比較小了，而且撈載玻片的時(shí)候好方向一致，以便觀察，再將撈出來(lái)的載玻片置于架子上，放入37°C溫箱中烘干。