透射電鏡檢測時的取材要求是什么？

　　透射電鏡檢測是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像，投射到熒光屏上或照相底片上進(jìn)行觀察。電子與樣品中的原子碰撞而改變方向，從而產(chǎn)生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關(guān)，因此可以形成明暗不同的影像。由于電子易散射或被物體吸收，故穿透力低，必須制備超薄切片(通常為50～100nm)。要在機(jī)體死亡后的數(shù)分鐘內(nèi)取材，組織塊要小(1mm3以內(nèi))，常用戊二醛和鋨酸雙重固定，包埋介質(zhì)包埋,用超薄切片機(jī)切成薄片，再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進(jìn)行電子染色。

　　透射電鏡檢測的取材要求：

　　1、定位準(zhǔn)確：解剖水平的準(zhǔn)確定位誤差應(yīng)≤1mm。注意各組實驗動物取材區(qū)位及方位的*性和代表性。

　　2、操作迅速：組織離開活體后，以zui快的速度浸入戊二醛固定液，0.5min或zui多2min。事先準(zhǔn)備好l1.5ml尖頭PEP管里面盛滿預(yù)冷的戊二醛固定液。

　　3、標(biāo)本尺寸大?。航M織塊大小需要在1mm3左右，樣品太大會導(dǎo)致樣品固定不充分。（提示：把較大標(biāo)本塊修整成符合要求的顆粒時，須事先準(zhǔn)備一個蠟盤，滴入戊二醛固定液，把標(biāo)本浸在液滴中修整，確認(rèn)每個小標(biāo)本顆粒都包含需要的結(jié)構(gòu)內(nèi)容，用牙簽挑出3～5粒標(biāo)本，放入l1.5ml尖頭PEP管。）

　　4、保持低溫環(huán)境：為降低自溶酶活性，在4℃低溫條件下取材，容器和器械預(yù)冷；將修整好的標(biāo)本塊放入戊二醛固定液后，普通4℃冰箱保存。細(xì)胞取材流程及要求

　　取材流程：細(xì)胞直接刮下，細(xì)胞懸液離心，棄上清，PBS清洗2次，離心成團(tuán)，加入2.5%戊二醛固定液4℃過夜后快遞。懸浮細(xì)胞、菌液可直接視為細(xì)胞懸浮液操作。

　　固體培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌可直接將菌落挑到PBS中，后續(xù)操作*。