肥胖模型

肥胖模型造模舉例：

①肥胖模型組采用高脂飼料喂養(yǎng)，高脂飼料：普通飼料60％，豬油12％，蔗糖５％，花生５％，雞蛋10％，麻油１％，食鹽２％，魚肝you適量；對照組普通飼料喂養(yǎng)，共８周。

所有大鼠在造模期間自由攝食和飲水，保持室內(nèi)溫度２０±１℃，濕度在40％－60％之間，記錄兩組大鼠體重、體長、Ｌｅｅ’ｓ指數(shù)，并檢測各組血脂水平。

②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:40只SD雄性大鼠，動(dòng)物等級SPF，體重(75±5)g。在有空調(diào)的動(dòng)物室分籠飼養(yǎng)，溫度19～26℃，相對濕度40%～70%，每籠5只，照明時(shí)間12h。

給予高脂飼料適應(yīng)飼養(yǎng)2周后，將體重增加排在后1/3的大鼠作為肥胖抵抗大鼠剔除。其余大鼠隨機(jī)分成2組，即正常對照組給予普通飼料飼喂，高脂飲食組給予高脂飼料喂養(yǎng)。

觀察指標(biāo):

①一般情況觀察:每天觀察動(dòng)物的精神狀態(tài)、皮毛光澤、活動(dòng)、食欲、大便等情況，并詳細(xì)記錄。

②體重:每周稱重1次。

③體長及Lee's指數(shù):實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，麻醉后測量體長(大鼠從鼻至肛men的長度)，并根據(jù)公式［Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(cm)］計(jì)算Lee's指數(shù)。

④脂肪濕重及脂肪指數(shù):實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，取體脂(網(wǎng)膜、睪周及腎周脂肪)并稱重，計(jì)算脂肪指數(shù)。脂肪指數(shù)(%)=(腎周脂肪+睪周脂肪+網(wǎng)膜脂肪)/體重×100。

⑤血脂測定:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，大鼠經(jīng)24h禁食麻醉自頸動(dòng)脈采血，離心并分離出血清，用全自動(dòng)生hua分析儀檢測血清總膽gu醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽gu醇(HDL－C)和低密度脂蛋白膽gu醇(LDL－C)水平。

⑥肝脂測定:取肝臟左葉重約1g，在1∶9勻漿介質(zhì)(甲醇∶yi醚=1∶1)中，以電動(dòng)勻漿機(jī)4℃下制成10%勻漿，4℃下4000r/min離心10min，提取上清液，采用全自動(dòng)生hua分析儀檢測TC、TG。

這種模型發(fā)育的時(shí)間更接近于大多數(shù)人群體重增加的過程。而這種模型也受很多因素的影響，如品系、性別、周齡、飲食等。

高脂飼料配方并不固定，很多研究均在 探討營養(yǎng)性肥胖造模配方，通常采用的飼喂方法有自由采食及灌胃等。該類造模方法成本較低，成功率高，且具有較強(qiáng)的重復(fù)性

藥物誘導(dǎo)肥胖模型

1. 谷an酸鈉（MSG）誘導(dǎo)

新生小鼠或大鼠皮下注射MSG可誘導(dǎo)其產(chǎn)生肥胖。

高劑量谷an酸鈉可以損傷下丘腦弓狀核及其鄰近區(qū)域，導(dǎo)致攝食及能量代謝紊亂，引起肥胖。谷an酸鈉誘導(dǎo)的肥胖模型會出現(xiàn)高血糖、高脂血癥和胰島素抵抗，但這種方法會抑制肝脂質(zhì)沉積，所以除了肥胖外它還可以用作非酒精性脂肪肝的動(dòng)物模型。

實(shí)驗(yàn)方法：

新生ICR乳鼠自出生當(dāng)天開始每日注射谷an酸鈉（MSG）連續(xù)4ｄ，每籠1只母鼠喂養(yǎng)乳鼠3～6只，飼以基礎(chǔ)飼料，任意飲氯化水，置于標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物室。在6周齡時(shí)連續(xù)4ｄ測定每籠攝入和散落的飼料量，計(jì)算平均飼料和水?dāng)z入量·鼠。實(shí)驗(yàn)期間定時(shí)測定尿糖、血糖、胰島素、總膽gu醇（TC），TG，低密度脂蛋白-膽gu醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽gu醇（HDL-C）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）以及做糖耐量試驗(yàn)、胰島素耐受試驗(yàn)?并測量小鼠從口至肛men的長度、稱重。用方程式：體重（ｇ）／體長2（ｃｍ2）計(jì)算身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。

實(shí)驗(yàn)?zāi)┧行∈笕「?、胰、腎、眼、坐骨神經(jīng)、內(nèi)臟白色脂肪組織、肩胛間棕色脂肪組織、主動(dòng)脈和大腦稱重，然后作病理檢查。

2. 金硫葡萄糖（GTG）致肥胖模型

給成年小鼠腹腔注射GTG可誘導(dǎo)其產(chǎn)生肥胖，金硫葡萄糖是損傷下丘腦腹內(nèi)側(cè)核，增加食欲引起肥胖。其作用機(jī)制尚不明確且金硫葡萄糖價(jià)格高昂、造模時(shí)間長且腹腔注射動(dòng)物死亡率高限制了它的應(yīng)用。

這種動(dòng)物的血糖升高，血清胰島素水平也升高；從其胰島分離的細(xì)胞的胰島素合成顯著增加cAMP含量和葡萄糖氧化亦顯著增加。胰島素敏感性受抑制，胰島肥大伴脫顆粒，提示該肥胖模型與B細(xì)胞反應(yīng)改變有關(guān)。

研究發(fā)現(xiàn)，在注射GTG后2周，動(dòng)物心臟對葡萄糖致丙酮酸脫氫酶升高的反應(yīng)減弱，在WAT和BAT升高2～3倍，而這些反應(yīng)在給藥后5～10周消失。肝中糖元儲存增加，磷酸化酶的激活及磷酸葡萄糖均顯著增加，這可能與胰島素抵抗及葡萄糖耐量異常有關(guān)。