簡要描述:光老化模型構(gòu)建:皮膚衰老是一個由基因和外界環(huán)境因素等共同作用下的結(jié)果。皮膚老化根據(jù)影響因素的不同分為內(nèi)源性老化和外源性老化。
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光老化模型構(gòu)建模式動物
品系SPF級ICR小鼠,健康,雄性,6~8W。
來源UVA,UVB紫外導(dǎo)致皮膚老化
實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。
實驗周期4-6 weeks
光老化模型構(gòu)建造模方式
雄性ICR小鼠,年齡約6周。小鼠在正常溫度下(23±2℃)濕度(55%±10%)和光照(12小時光照/ 12小時黑暗,無紫外線照射)喂養(yǎng)。喂養(yǎng)一周,等小鼠適應(yīng)了環(huán)境,用8%硫化鈉在小鼠的背部剃出超過2厘米x3厘米的脫毛區(qū)。
紫外照射方法:2根UVB燈管和4根UVA燈管(40W,北京電光源研究所)并列穿插安放至自制福照箱中作為紫外福照光源。利用紫外照度儀(UV-B紫外輻照計、UV-A紫外輻照計 北京師范大學(xué)光電儀器廠 )測定UVA和UVB的輻射強度。造模前,UV燈管預(yù)熱10 min,待光源穩(wěn)定后將實驗鼠放入自制的鼠籠內(nèi)(使小鼠間不能相互攀爬、站立),并放入箱照箱內(nèi),鼠籠與UV燈管相距30 cm,根據(jù)預(yù)試所得最小紅斑劑量(MED)及光源強度調(diào)節(jié)福照時間,照射期間用排氣扇降低箱體溫度。第1周按1個MED的劑量進行照射,每周照射3次,往后每周照射劑量比前周遞增1個MED,直至第4周4個MED為止,之后保持4個MED直至第8周實驗結(jié)束。模型組小鼠背部皮膚出現(xiàn)明顯增厚、皺紋粗深、松弛等光老化皮膚表征,說明小鼠皮膚光老化造模成功。
MED測定方法:對預(yù)實驗小鼠分別采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的紫外福照劑量對其背部皮膚進行輻照,照射后24h觀察小鼠背部皮膚出現(xiàn)肉眼可見紅斑所需劑量為最小紅斑劑量(MED)。
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