簡(jiǎn)要描述:中耳炎動(dòng)物模型:中耳炎(otitis media)是累及中耳(包括咽鼓管、鼓室、鼓竇及乳突氣房)全部或部分結(jié)構(gòu)的炎性病變。可分為非化膿性及化膿性兩大類。非化膿性者包括分泌性中耳炎、氣壓損傷性中耳炎等,化膿性者有急性和慢性之分。特異性炎癥太少見,如結(jié)核性中耳炎等。
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中耳炎動(dòng)物模型脂多糖誘導(dǎo)
從細(xì)菌學(xué)及組織學(xué)檢查的結(jié)果以及臨床征象的研究表明,SOM可能是中耳的一種輕型的或低毒性的細(xì)菌感染,而細(xì)菌分解產(chǎn)物——內(nèi)毒素在SOM的發(fā)病機(jī)制中起一定的作用。它是細(xì)菌死亡時(shí)以一種生物活性的形式釋放出來的一種物質(zhì),主要成分為脂多糖(LPS),能引起中耳黏膜結(jié)締組織增生,細(xì)胞密度增大,毛細(xì)血管的通透性增高,腺體及杯狀細(xì)胞增生,分泌增加,并破壞正常的黏膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),促進(jìn)中耳積液的蓄積,導(dǎo)致SOM的發(fā)生。
其還可以激活補(bǔ)體,使嗜堿性粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞釋放組織胺、5-羥色胺等血管活性介質(zhì)及趨化因子,導(dǎo)致血管擴(kuò)張,毛細(xì)血管通透性增加,白細(xì)胞向炎癥病灶部位聚集,促進(jìn)吞噬。在發(fā)揮吞噬作用的過程中,釋放溶酶體酶等生物活性物質(zhì),破壞致病菌的同時(shí)也可損傷鄰近組織,加劇炎癥損傷組織細(xì)胞,導(dǎo)致SOM。因此,LPS被大量應(yīng)用于建立SOM動(dòng)物模型中。
中耳炎動(dòng)物模型造模方法:
本模型采用手術(shù)暴露聽泡,每側(cè)聽泡內(nèi)注射脂多糖,誘導(dǎo)大鼠中耳炎形成法。
動(dòng)物的選擇:6-8周齡,200-300g左右的健康SD大鼠(手術(shù)xian微鏡下查看,無中耳疾病),性別不限
制備周期:3天,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整
制備方法:正常對(duì)照組正常飼養(yǎng)一周,不做任何干預(yù)處理。SD大鼠麻醉后,手術(shù)暴露聽泡,在無菌條件下用50ul微量注射器每側(cè)聽泡內(nèi)注射1mg/ml脂多糖一次,注射量40ul,于注射48小時(shí)后處死取樣。對(duì)照組大鼠注射40ul的生理鹽水溶液。
通過病理HE染色分析判斷模型:由HE染色結(jié)果圖可知,模型組聽泡黏膜明顯增厚,部分黏膜上皮纖毛排列紊亂,黏膜組織腫脹,可見較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的SOM模型具有與臨床上SOM患者相似的癥狀。這個(gè)造模的方法既強(qiáng)調(diào)了感染性因素在SOM的核心作用,也注意到咽鼓管堵塞的重要作用。
該方法也有一些缺點(diǎn):出現(xiàn)中耳滲液的幾率也不是很高,而且持續(xù)的時(shí)間短。使用聽泡內(nèi)先注入纖維蛋白封閉劑(fibrin sealant)再注入LPS的方法提高單純聽泡內(nèi)注入LPS的方法的成功率,SOM病程也隨之延長(zhǎng)。
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