簡要描述:腫瘤動物模型:常用見的動物實驗是腫瘤動物模型的構建,一般包括小鼠移植瘤模型和轉基因動物模型。轉基因動物模型則是引入致癌基因或敲除抑癌基因建立自發(fā)腫瘤或誘導生成腫瘤的轉基因模型小鼠,再在模型小鼠的基礎上進行相應的實驗。
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腫瘤動物模型第一類是皮下移植瘤
顧名思義,這種模型的建立是將腫瘤細胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下。種植的點也有講究,一般選擇血運淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩??筛鶕嶒炘O計選擇移植點,統(tǒng)一移植點的位置,除了遵守實驗統(tǒng)一的條件外,待腫瘤成熟后收集腫瘤時留下照片證據也顯得美觀。
裸鼠(Balb/c 鼠, 無毛發(fā), T 淋巴細胞缺陷)是比較常見和常用的實驗用鼠,尤其是在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。當然,這種腫瘤模型也有缺陷,即不能很準確的模擬正常人體腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程。
腫瘤動物模型腫瘤細胞移植時的簡要步驟
首先準備好要移植的腫瘤細胞(細胞量根據不同腫瘤略有不同,我們所用的前列腺癌細胞系每個移植點一般選擇 1x106 左右;腫瘤細胞可與基質膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取,基質膠能夠給腫瘤細胞提供營養(yǎng)環(huán)境,有助于腫瘤細胞生長)。
戴無菌手套后,將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚,然后將鼠尾用左手無名指和小指固定于左手大魚際。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細胞和基質膠混合液的注射器,在腹股溝或腋窩的位置,45 度斜角進針,注意不要突破腹膜,將針頭保持于皮下位置。
然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下,將混有基質膠的腫瘤細胞注射入皮下(腫瘤細胞量約 1x106),快速退針,左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養(yǎng)籠中,注意將小鼠側放于墊料上,放置其不適嘔吐時嘔吐物誤入呼吸道引起窒息。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。
如果是利用腫瘤組織(人體腫瘤標本或小鼠移植瘤傳代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,則需要首先將腫瘤組織用無菌 PBS(或 1640 培養(yǎng)基)洗滌 3 次,然后在無菌平皿上切成或用無菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊(種植前可裹基質膠)備用。
將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上,四肢用膠帶固定,將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪開約 0.5 cm 小口,小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開,然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部,每個位置放置 2~3 塊腫瘤組織,注意不同組間統(tǒng)一放置腫瘤組織塊數以保持一致。
然后縫合皮膚,消毒后將小鼠側臥位放置于飼養(yǎng)籠的墊料上。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。
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