腫瘤動(dòng)物模型

腫瘤動(dòng)物模型第一類是皮下移植瘤

顧名思義，這種模型的建立是將腫瘤細(xì)胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下。種植的點(diǎn)也有講究，一般選擇血運(yùn)淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩。可根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇移植點(diǎn)，統(tǒng)一移植點(diǎn)的位置，除了遵守實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一的條件外，待腫瘤成熟后收集腫瘤時(shí)留下照片證據(jù)也顯得美觀。

裸鼠（Balb/c 鼠， 無(wú)毛發(fā)， T 淋巴細(xì)胞缺陷）是比較常見和常用的實(shí)驗(yàn)用鼠，尤其是在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然，這種腫瘤模型也有缺陷，即不能很準(zhǔn)確的模擬正常人體腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程。

腫瘤動(dòng)物模型腫瘤細(xì)胞移植時(shí)的簡(jiǎn)要步驟

首先準(zhǔn)備好要移植的腫瘤細(xì)胞（細(xì)胞量根據(jù)不同腫瘤略有不同，我們所用的前列腺癌細(xì)胞系每個(gè)移植點(diǎn)一般選擇 1x106 左右；腫瘤細(xì)胞可與基質(zhì)膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取，基質(zhì)膠能夠給腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，有助于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)）。

戴無(wú)菌手套后，將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚，然后將鼠尾用左手無(wú)名指和小指固定于左手大魚際。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)膠混合液的注射器，在腹股溝或腋窩的位置，45 度斜角進(jìn)針，注意不要突破腹膜，將針頭保持于皮下位置。

然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下，將混有基質(zhì)膠的腫瘤細(xì)胞注射入皮下（腫瘤細(xì)胞量約 1x106），快速退針，左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養(yǎng)籠中，注意將小鼠側(cè)放于墊料上，放置其不適嘔吐時(shí)嘔吐物誤入呼吸道引起窒息。2～3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。

如果是利用腫瘤組織（人體腫瘤標(biāo)本或小鼠移植瘤傳代）建立裸鼠皮下移植瘤模型，則需要首先將腫瘤組織用無(wú)菌 PBS（或 1640 培養(yǎng)基）洗滌 3 次，然后在無(wú)菌平皿上切成或用無(wú)菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊（種植前可裹基質(zhì)膠）備用。

將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上，四肢用膠帶固定，將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次，然后用眼科剪剪開約 0.5 cm 小口，小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開，然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部，每個(gè)位置放置 2～3 塊腫瘤組織，注意不同組間統(tǒng)一放置腫瘤組織塊數(shù)以保持一致。

然后縫合皮膚，消毒后將小鼠側(cè)臥位放置于飼養(yǎng)籠的墊料上。2～3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。