簡(jiǎn)要描述:DSS潰瘍性結(jié)腸炎實(shí)驗(yàn):是伊萊博生物較為成熟的動(dòng)物模型之一,由動(dòng)物平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。
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本實(shí)驗(yàn)?zāi)P褪褂眯∈蟆⒋笫?、兔等?dòng)物均可造模,通過(guò)給予動(dòng)物自由飲用不同濃度的DSS(MW:36000~50000)水溶液,根據(jù)用藥時(shí)間及用藥周期可制成急性和慢性兩種結(jié)腸炎模型。該模型癥狀表現(xiàn)與人類UC極為相似,主要表現(xiàn)為腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動(dòng)度減少,毛色變差等。
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每組至少8-10只小鼠。
2.造模試劑:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。
3.DSS濃度:急性期模型通常為3-5%,慢性期模型通常為1-3%;可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求及動(dòng)物類型摸索濃度。該濃度為質(zhì)量體積比,使用飲用水配置后,過(guò)濾除菌。
二、模型構(gòu)建
慢性與急性結(jié)腸炎模型的構(gòu)建時(shí)間分別為:8天與50天,使用DSS濃度為3-5%和1-3%,之后脫頸,取腸道組織,進(jìn)行相應(yīng)病理染色。
三、如何評(píng)價(jià)造模是否成功
1)疾病活躍指數(shù)評(píng)分:
從三個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估打分,分別為體重、糞便粘稠度、糞便潛血等指標(biāo)。
2)組織學(xué)變化評(píng)分:
a)潰瘍形成個(gè)數(shù);
b)上皮細(xì)胞變化;
c)炎癥浸潤(rùn);
d)淋巴結(jié)形成;
組織學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法為HE染色。
3)結(jié)腸長(zhǎng)度:
急性結(jié)腸炎模型中,第8天可檢測(cè)到結(jié)腸長(zhǎng)度縮短;慢性結(jié)腸炎模型中,結(jié)腸長(zhǎng)度縮短更加明顯。
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