簡要描述:平板克隆形成技術服務當單個細胞在體外增殖6代以上,其后代所組成的細胞群體,稱為集落或克隆。每個克隆含有50以上的細胞,大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細胞的獨立生存能力,各種理化因素可能導致細胞的克隆形成能力發(fā)生改變,通過計數(shù)克隆形成率可對單個細胞的增殖潛力做定量分析,了解細胞的增殖能力和獨立生存能力。
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平板克隆形成技術服務基本步驟:
1.取對數(shù)生長期的各組細胞,分別用0.25%****消化并吹打成單個細胞并把細胞縣浮在10%胎生血清的DMEM培養(yǎng)液中衡用。
2.將細胞具酒作梯度倍數(shù)稀釋,每組細胞分別以每川50、100,200個細胞的梯度密度分別接種合10mL 37"C預溫培養(yǎng)液的皿中,并輕輕轉(zhuǎn)動,使細胞分散均勻。置37C、5%COz及飽和溫度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3周。
3.經(jīng)常觀察,當培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng)。棄去上清液,用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定細胞5ml固定15分鐘。然后安固定液加適量GIMSA應用染色液染10-30分鐘然后用流水緩慢洗去染色源,空氣干燥。
4.將平皿倒置并疊加一張帶網(wǎng)格的適明膠片,用肉眼直接計數(shù)克隆或在顯微鏡(低倍鏡)計數(shù)大于10個細胞的克隆數(shù),再計算克隆形成率,克隆形成率=克隆數(shù)/接種細胞數(shù)。
平板克隆形成技術服務流程:
1)項目方案的確定,包括目的細胞、 細胞處理方式及處理時間等;
2)細胞培養(yǎng);
3)克隆形成實驗;
4)克隆形成實驗圖片及實驗報告。
我們擁有專業(yè)的實驗室、精良的實驗設備和經(jīng)驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、較好的的服務平臺,為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。目前,及,涉及臨床醫(yī)學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫(yī)學等諸多領域。
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