流式JC-1檢測實驗服務(wù)

簡要描述：線粒體膜電位是指線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的電位差，它是細(xì)胞能量代謝的關(guān)鍵指標(biāo)之一。JC1是一種常用的線粒體膜電位檢測染料，其原理是基于JC1 在不同濃度下呈現(xiàn)出不同的熒光顏色。
JC1 有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)。在低濃度時，JC1 以單體存在，此時可以檢測到綠色熒光。在流式檢測中，通常使用 FL-1通道（與 FITC通道）進(jìn)行檢測。當(dāng) JC1 濃度較高時，它會以多聚體形式存在，此時可以檢測到紅色熒光。在流

更新時間：2024-06-17
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JC-1線粒體膜電位熒光探針染色步驟（流式細(xì)胞儀法）：

1. 于6-，12或24-孔板上進(jìn)行細(xì)胞鋪板，密度為5×105 cells/mL。37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。選擇合適的化合物根據(jù)特定的步驟進(jìn)行凋亡誘導(dǎo)。注：進(jìn)行凋亡誘導(dǎo)時的細(xì)胞密度建議不超過1×106 cells/mL，也可根據(jù)自己的細(xì)胞類型培養(yǎng)至合適的密度。

2. 取0.5 mL細(xì)胞懸液至無菌的離心管內(nèi)；

3. 室溫條件400 x g離心5 min；吸掉上清。

4. 用0.5 mL JC-1工作液重懸細(xì)胞，于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱孵育15-30 min；注意：一般情況，15 min足以進(jìn)行充分的染色。

5. 室溫條件400 x g離心5 min；吸掉上清；

6. 用2 mL細(xì)胞培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細(xì)胞，之后室溫條件400 x g離心5 min；吸掉上清；

7. 重復(fù)步驟6）；

8. 用0.5 mL新鮮培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細(xì)胞，即可進(jìn)行后續(xù)的流式分析。注意：請馬上進(jìn)行流式定量分析，此細(xì)節(jié)很重要。

數(shù)據(jù)分析：含有紅色JC-1聚集物的健康細(xì)胞線粒體用FL2通道檢測；含有綠色JC-1單體的凋亡或不健康細(xì)胞用FL1（FITC）通道檢測。

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